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怎样预防肠孢子虫病


当今,威胁虾类养殖的罪魁祸首有两个,一个是感染副溶血弧菌引起的早期死亡综合征(EMS);另一个是感染肠道上皮细胞微孢子虫(EHP)引起的虾类长不大。EMS目前已有多种防控和治疗方法,但EHP至今无有效治疗方法。受连年持续的病害影响,虾类养殖户信心受损,养殖面积和产量不断下降。


一.微孢子虫病的病原体

微孢子虫病的病原体是微孢子虫,微孢子虫是一种细胞内寄生的单细胞的真核生物,既能寄生在虾蟹等无脊椎动物类群内,也能寄生在鱼类、兔类、皮毛动物和人上,但主要寄生在虾蟹等无脊椎动物内。微孢子虫种类繁多,寄生于对虾的微孢子虫大多属于微孢子科中的四个属,即八孢虫、微粒子虫、匹里虫和肠道上皮细胞微孢子虫EHP。微粒子虫属的微孢子虫主要寄生部位是对虾的肌肉组织,匹里虫不仅寄生肌肉组织,还侵染心脏、鳃、胃、肝脏及肠,肠道上皮细胞微孢子虫寄生在肠道和肝胰腺。


二.微孢子虫疾病的传播途径

孢子被虾蟹吞入消化道后,迅速被活化,随后继续侵染肠道、肝或者其他组织。微孢子虫感染途径主要是由口进入消化道感染虾蟹细胞。因此控制饲料、水质、环境不被微孢子虫感染是防治微孢子虫病的主要途径。但是,微孢子虫病不存在隔代传播,亲虾应该不会直接把微孢子虫病传染给虾苗。


三.微孢子虫疾病的症状

对虾体内的微孢子虫感染微孢子虫病的症状主要有以下几种:


1、白浊虾

感染微孢子虫病的对虾机体变白,剥去甲壳后,可看到肌肉组织为乳白色。但是必须要和亚硝酸盐超标引起的症状区别开,当发现对虾身体白浊时一定要先排除亚硝酸盐中毒的可能性,避免延误了抢救时间导致不可挽回的损失。


2、棉花虾

主要感染对虾的性腺和横纹肌,引起肌肉白浊、不透明,失去弹性,称之为乳白虾或棉花虾。如果感染微孢子虫病的病虾出现棉花虾,基本上就没有挽回的可能性。如果是伺料营养不良引起的棉花虾,可以通过补充适当的氨基酸或者优质动物蛋白质,可以在3天左右有明显好转的效果,出现这种棉花虾是可以挽回的。



3、长不大

虾感染肠道上皮细胞微孢子虫EHP后,最明显的特征就是生长速度会变得缓慢,导致对虾个体差异大、参差不齐。但感染了EHP的虾,并不会立即死亡,其肠道也是非常饱满,食欲正常,一样能正常吃料,肠、胃充满着食物,肝胰腺略微萎缩,发软,但颜色很深。从表面上看起来,虾并没有明显疾病症状,但就是光吃料不长个,偶尔伴随有白便,造成巨大的经济损失。


四、肠道上皮细胞微孢子虫EHP

肠道上皮细胞微孢子虫(简称肠孢子虫,EHP)是由一种微孢子虫寄生引起的,在2009年,在泰国生长缓慢的斑节对虾上发现症状而命名,肠孢子虫只局限于对虾肠道和肝胰腺。肠孢子虫是一种很小的孢子虫,体长不到1微米,其主要感染对虾的肠道表皮、肝胰腺,引起对虾肠道吸收功能下降,严重的出现肠炎和肝胰腺萎缩。肠孢子虫在肝胰腺细胞质中由早期的原生质阶段发育为成熟的椭圆形孢子,大小为0.7×1.1微米,单核、5~6圈极丝、有一锚盘连着极丝、后端有一个空泡,孢子壳密度高而硬。肠孢子虫可以垂直传播也可以水平传播,如从种苗携带病原垂直传播,或者被肠孢子虫污染了养殖池进行水平传播。


肠道上皮细胞微孢子电镜下图:



五、肠孢子虫病与传染性皮下及造血器官坏死病毒病的区别

传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)可使对虾患上慢性“矮小残缺综合症”,影响对虾的生长,同样会使虾长不大,患病虾表现为额剑和触角弯曲、变形,甲壳粗糙无光泽或残缺等病变,表现为胃表皮、后肠、鳃、条纹肌、神经节、连接组织、血细胞、造血器官的炎症性病变,严重的表现为坏死。感染传染性皮下及造血器官坏死病毒的虾终生带毒,可以通过相互感染传染给其他群体,也可通过受精卵将病毒传染给下一代,也能通过同类残食的方式进行传播。病虾在养殖水体环境恶化时,会伴随着大量死亡。


六、肠孢子虫病的诊断诊断对虾有无感染肠孢子虫病,需要对其进行实验室套式PCR检测进行DNA确诊。

聚合酶链式反应(PCR)是以待测样品的一段DNA作为模板,以与模板两端互补的特异性寡核苷酸序列作为引物,在四种脱氧核糖核苷三磷酸存在下,利用依赖DNA的DNA聚合酶的作用下。经过数十次变性、退火和延伸的反应循环,使模板上介于两个引物之间的DNA片段得到特异性地级数扩增,在通过电泳等手段检测到被特异性扩增的片段,从而可揭示微量病毒DNA的存在。本实验所使用的套式PCR是在第一步PCR扩增的产物内,在用一对引物进行第二步PCR扩增。套式PCR可大大增加PCR检测的灵敏度和反应特异性。



七、对虾肠孢子虫病的防控措施

目前,对虾肠孢子虫病的治疗还没有有效的措施,因此,做好以下预防工作非常重要:


1、选择无病原的虾苗

不投放携带任何一种病原体的虾苗。选购虾苗前,先通过PCR检测,检查虾苗有无携带细菌、病毒及孢子虫,确保虾苗不带任何一种病原体。


2、严控虾苗饵料

虾苗标粗要投喂没有感染肠孢子虫的活饵和饵料,严防虾苗由于吃了带肠孢子虫的饵料而感染肠孢子虫。


3、虾塘杀虫消毒

先前被感染过肠孢子虫出现养不大的虾塘,肠孢子虫的孢子处于休眠状态,潜伏在虾塘的土壤里,由于肠孢子虫的孢子有很厚的细胞壁和外壳,使用高浓度的氯剂、碘剂、杀虫剂等药物都不易被灭杀。目前杀灭土壤里的肠孢子虫孢子采用强碱消毒法,每亩用生石灰200kg,撤入干池塘底,翻耕底泥10公分左右,加水10公分左右,土壤的pH值会升到12以上从而杀灭肠孢子虫。然而曝晒半个月以上,或直接晒至来年养殖。用这种方法不光能杀灭肠孢子虫,还能有效地杀死鱼塘中的野杂鱼、敌害生物和寄生虫、病原菌等,也能将塘底有机质发酵成有机钙肥。养殖户不必担心大量使用生石灰会造成虾的养殖水PH值升高,这是因为生石灰水会吸收二氧化碳而変为碳酸钙从而使pH值回落到正常范围内(10天就可以是PH下降到正常范围)。


4、增强对虾免疫力

对虾体质强,感染任何病原的风险降低很多。养殖期间,建议投喂营养均衡的高档对虾配合饲料,内服多维、小肽、寡糖、微量元素等保健产品,增强对虾抗病力,尽量少投喂鲜活饵料,防治未知病原菌进入池中,导致对虾发病死亡。


研发中心:刘芳


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